Test bakterijskog endotoksina (BET) provodi se u većini modernih laboratorija u kontroliranim uvjetima kao važan čimbenik za izbjegavanje interferencije.
Prikladnoaseptična tehnikavažan je kod pripreme i razrjeđivanja standarda i rukovanja uzorcima.Haljinapraksa izvan normalne laboratorijske osobne zaštitne opreme (OZO) zahtjevi nisu zabrinjavajući osim ako proizvod koji se ispituje zahtijeva posebna sigurnosna razmatranja analitičara zbog toksičnosti ili zaraznosti.Rukavicetreba biti bez TALC-a, budući da TALC može sadržavati značajne razine endotoksina.Čitači ploča, vodene kupke i blokovi suhe toplinekoji se koristi za inkubaciju uzorka trebao bi biti na laboratorijskom stolu daleko od kanala za grijanje, ventilaciju i klimatizaciju (HVAC), značajnih vibracija i laboratorijskog prometa koji bi mogao utjecati na rezultate ispitivanja.Vrijeme i uvjeti držanja uzorakatreba utvrditi i naknadno dokumentirati, ako je potrebno, kako bi se osiguralo da se točni rezultati ispitivanja mogu generirati u kvalificiranom vremenu.
Na primjer, ako laboratorij primi vodu za injektiranje (WFI) ili uzorak u procesu, mora li biti u hladnjaku ili može ostati na sobnoj temperaturi i koliko dugo?Prije testiranja, preporuča se da se spremnik(i) primarnog uzorka adekvatno promiješa(ju) prije uklanjanja alikvota(a) za ispitivanje radi izravnog testiranja ili naknadnog razrjeđivanja.
Bioendo test bakterijskog endotoksina, uključujući eksperimentegel clot metodaispitivanje endotoksina ikvantitativni test endotoksina, metoda gel ugruška endotoksinski test test je kvalitativno otkrivanje endotoksina, ovaj eksperiment zahtijeva potrošni materijal je obrada depirogenacije, kao što su reakcijske cijevi bez endotoksina, cijevi za razrjeđivanje i vrhovi bez pirogena;kvantitativno otkrivanje endotoksina imaju kinetički kromogeni test endotoksina, kinetički turbidimetrijski test endotoksina, ovi eksperimenti zahtijevaju da potrošni materijal mora zadovoljiti najvišu razinu endotoksina manje od0,005 EU/ml(0,001EU/ml), kao što su epruvete bez endotoksina, vrhovi bez pirogena i mikropločice bez pirogena, čak i rezervoar bez pirogena.Usput, ako se uzorci tretiraju, spremnik mora biti boca za uzorke bez endotoksina.
U ispitivanju endotoksina, smetnje mogu proizaći iz raznih izvora, kao što su komponente matrice uzorka, testni reagensi ili oprema.
Kako bi se izbjeglo ometanje eksperimenta, mogu se poduzeti sljedeće mjere:
1. Priprema uzorka: Pravilna priprema uzorka ključna je za točno testiranje endotoksina.
Matrica uzorka treba biti temeljito testirana i optimizirana kako bi se osigurala kompatibilnost s ispitivanjem endotoksina.
Konkretno, interferirajuće tvari kao što su lipidi i proteini trebaju biti uklonjene ili minimizirane korištenjem odgovarajućih tehnika kao što su filtracija ili centrifugiranje.
2. Pozitivne i negativne kontrole: neophodno je uključiti pozitivne i negativne kontrole u analizu kako bi se pratila interferencija.
Pozitivne kontrole potvrđuju funkcionalnost testa, dok negativne kontrole otkrivaju bilo kakvu kontaminaciju ili smetnje od komponenata testa.
3. Kontrola kvalitete: Kontrolu kvalitete treba provesti na svim reagensima, opremi i vodi koja se koristi u analizi.
Time se osigurava da reagensi nisu kontaminirani endotoksinima i da ispravno rade.
4. Standardizacija: Test treba standardizirati kako bi se osiguralo da su svi rezultati usporedivi i ponovljivi.
To uključuje korištenje standardne krivulje za kalibraciju testa i korištenje standardiziranih tehnika za pripremu uzorka, inkubaciju i detekciju.
5. Validacija: Test treba validirati kako bi se osiguralo da je specifičan, osjetljiv i pouzdan.
To uključuje testiranje niza uzoraka, uključujući one za koje se zna da sadrže endotoksin, kako bi se odredila točnost i preciznost testa.
Slijedeći ove mjere, smetnje se mogu svesti na najmanju moguću mjeru i može se postići precizno testiranje endotoksina.
Vrijeme objave: 1. prosinca 2022
