Primjena kromogene tehnike u ispitivanju bakterijskih endotoksina

Kromogena tehnika je jedna od tri tehnike koje također sadrže tehniku ​​gel-ugrušaka i turbidimetrijsku tehniku ​​za otkrivanje ili kvantificiranje endotoksina iz Gram-negativnih bakterija korištenjem amebocitnog lizata ekstrahiranog iz plave krvi potkovičara (Limulus polyphemus ili Tachypleus tridentatus).Može se klasificirati kao kromogeni test krajnje točke ili kinetičko-kromogeni test na temelju određenog korištenog principa testa.

Princip reakcije je sljedeći: amebocitni lizat sadrži kaskadu enzima serin proteaze (proenzima) koje mogu aktivirati bakterijski endotoksini.Endotoksini aktiviraju proenzime za proizvodnju aktiviranih enzima (nazvanih koagulaza), potonji katalizira cijepanje bezbojnog supstrata, oslobađajući žuto obojeni produkt pNA.Oslobođena pNA može se mjeriti fotometrijski na 405 nm.Apsorpcija je u pozitivnoj korelaciji s koncentracijom endotoksina, pa se koncentracija endotoksina može prema tome kvantificirati.


Vrijeme objave: 29. rujna 2019